【性能特點(diǎn)】
傳統(tǒng)蛋白分析的實(shí)驗(yàn)技術(shù)主要是蛋白印跡，由于操作步驟多，操作繁瑣，每一步的失誤都會造成失敗，從而重復(fù)實(shí)驗(yàn)，對于珍貴樣品，更是要小心。另外，試驗(yàn)流程長，結(jié)果重復(fù)性差，要好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，成本也會很高。同時，傳統(tǒng)的蛋白印跡實(shí)驗(yàn)技術(shù)無法實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量，充其量是半定量。
Wes系統(tǒng)采用革新的Simple Western技術(shù)，30多年傳統(tǒng)的Western Blot方法，實(shí)現(xiàn)在同一根樣品管中完成樣品分離、捕獲、固定，免疫檢測和定量分析。
1、不用制膠和跑膠，不用轉(zhuǎn)膜，減少實(shí)驗(yàn)步驟，避免樣品損失。
2、自動進(jìn)行一二孵育和化學(xué)發(fā)光檢測，自動進(jìn)行結(jié)果分析，檢測結(jié)果的性和重復(fù)性。
3、單個樣品上樣體積3-5ul，節(jié)約珍貴樣品和體。
4、運(yùn)行時間3個小時，快速。
5、檢測靈敏度高，pg級。
6、實(shí)驗(yàn)完成后自動給出詳盡的分析數(shù)據(jù)，包括目的蛋白大小、信噪比、峰面積和含量。
7、可對結(jié)果自動進(jìn)行的定量分析。
Simple Western系統(tǒng)作為一個劃時代的蛋白質(zhì)分析新技術(shù)，自從2011年底推出以來，獲得了廣泛好評和，Nature Methods報道該技術(shù)。目前重要的研究機(jī)構(gòu)大多已經(jīng)擁有該技術(shù)平臺,如約翰霍普金斯大學(xué)、哈佛大學(xué)、斯坦福大學(xué)、耶魯大學(xué)、加州大學(xué)戴維斯分校、加州大學(xué)圣地亞哥分校、華盛頓大學(xué)、Machusetts General Hospital 、Mayo Clinic、Southwest Hospital、美國CDC、FDA。其中NIH有5臺、National Cancer Institute有4臺，Columbia University有4臺、美國默克制藥有12臺、阿斯利康有7臺、德國Charite University有4臺。
【蛋白定量檢測】
Add your samples and primary antibody or labeling reagent to the pre-filled ay plate. Pop in Wes' capillary cartridge and load the plate. Push start and in just 3 hours get quantitated size-based separation data on up to 25 samples. After the run, toss the used cartridge and plate and you're done.
Figure 1. Total Protein detection (left) and Immune detection (right) of decreasing concentrations of DNAK in Hela
lysate and negative controls (15, 7.5 and 3.75 μg/mL in the total protein ay; 0.015, 0.0075 and 0.00375 μg/mL in the
immunoay).
Figure 2. GST-labeled AKT was used to generate a standard curve for quantitation of endogenous AKT. AKT-GST was spiked into the Jurkat lysate at decreasing concentrations (250–0 pg/μL) and both the labeled and endogenous proteins were detected using an AKT1 monoclonal antibody. Linear regression
ysis was performed and the endogenous concentration of AKT in the samples was calculated as 21 pg/μL.
【技術(shù)指標(biāo)】
1、功能與應(yīng)用：可自動進(jìn)行各種蛋白質(zhì)樣品分離、免疫檢測、定性和定量分析，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)性質(zhì)鑒定、蛋白質(zhì)定量分析、蛋白質(zhì)功能研究、蛋白質(zhì)修飾和差異表達(dá)研究、體研究等多個領(lǐng)域；
2、全自動：蛋白樣品上樣后無需任何人工操作，自動完成Western Blot分析
3、總運(yùn)行時間：≤3個小時
4、樣品總蛋白量：≤5ug
5、樣品上樣體積：≤5ul
6、加樣：機(jī)械手自動完成25個樣品的加樣
7、分離方式：根據(jù)分子量大小分離，自動識別蛋白大小并完成分離
8、分離過程：30秒采集數(shù)據(jù)，實(shí)時監(jiān)測分離過程
9、制膠：無需制膠過程，減少操作程序，避免污染
10、固定時間：200秒，蛋白分離后自動固定到樣品管壁上
11、轉(zhuǎn)膜：無需轉(zhuǎn)膜步驟，不用擔(dān)心轉(zhuǎn)膜效率，避免樣品損失，蛋白質(zhì)定量結(jié)果的準(zhǔn)確率和重復(fù)性
12、體孵育：自動完成一二孵育和清洗
13、檢測方法：化學(xué)發(fā)光法
14、樣品數(shù)量：≥25個
15、樣品管規(guī)格：長125px，內(nèi)徑100um，總體積400nl
16、進(jìn)樣體積：40nL
17、靈敏度：pg級
18、動態(tài)范圍：3 logs
19、結(jié)果具有高度重復(fù)性：CV≤10%
20、結(jié)果分析：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，無需人工分析，軟件會自動給出蛋白分子量大小、信噪比、百分比和峰面積
21、結(jié)果呈現(xiàn)形式：化學(xué)發(fā)光成像結(jié)果，峰型圖結(jié)果和泳道式結(jié)果
22、定量分析：運(yùn)行結(jié)束后自動給出標(biāo)準(zhǔn)曲線，可定量分析
23、軟件升級：升級，可安裝在任意電腦上，沒有拷貝數(shù)限制
24、軟件設(shè)置：客戶可定義樣品名稱，設(shè)置檢測流程，軟件控制整個系統(tǒng)全自動運(yùn)行，自動完成蛋白質(zhì)樣品上樣、分離、固定、一孵育、二孵育，免疫化學(xué)發(fā)光檢測和定量分析
目前，ProteinSimple公司提供四種Simple Western儀器。如何選擇，請看下表。
關(guān)于PS公司
美國ProteinSimple公司 （簡稱 PS公司）是一家致力于定義未來蛋白質(zhì)分析的生命科學(xué)公司，它結(jié)合了Alpha Innotech、Cell Biosciences、Protein Forest、Brightwell Technologies和Convergent Bioscience等行業(yè)品牌，為生命科學(xué)、、制藥和生物公司提供簡單、和的技術(shù)平臺。
總部位于加州美國硅谷，在美國加州、加拿大多倫多、加拿大渥太華等地設(shè)有生產(chǎn)和研發(fā)部門，同時在多地設(shè)有辦事處。PS公司重視中國市場的發(fā)展，在北京、上海，廣州和武漢設(shè)有辦事處和技術(shù)服務(wù)中心，為用戶提供完善的技術(shù)支持和售后服務(wù)。
