黃曲霉毒素B1 ELISA快速檢測試劑盒

Aflatoxin B1 Test kit

（貨號：Ounuo98001）

一、原理

黃曲霉毒素B1 ELISA快速檢測試劑盒, 本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的殘留物黃曲霉毒素B1將和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭黃曲霉毒素B1抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素B1的含量成負相關，與標準曲線比較即可得出相應殘留物黃曲霉毒素B1的含量。

二、試劑盒特性

1） 試劑盒靈敏度：   0.02ppb

2）孵育溫度：       25℃

3）孵育時間：       30min～15min

4)  樣本檢測下限

飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油··········· 2 ppb

5) 交叉反應率(黃曲霉毒素B1 ELISA)

黃曲霉毒素B1 ···· 99.9%

黃曲霉毒素M1 ··· 6.6%

黃曲霉毒素B2 ··· 83%

黃曲霉毒素G1 ··· 107%

黃曲霉毒素G2 ··· 42%

6) 樣本回收

飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油 ··· 95±35%

三、樣本前處理步驟

1） 樣本處理前須知

（a）實驗中必須使用一次性吸頭，吸取不同試劑時要更換吸頭。

（b）實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實驗結果。

2）樣本前處理需配制：

配液1  樣本復溶液：

用去離子水將20×濃縮復溶液按1：19稀

釋（1份20×濃縮復溶液+19份去離子水）。

配液2  樣本提取液：

將甲醇與去離子水按7:3比例混合均勻（7份甲醇+3份去離子水）。

四、操作步驟(黃曲霉毒素B1 ELISA)

1、  從2～8℃冷藏環境中取出所需試劑，室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、  取出框架及需要數量的微孔，將不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。

3、  配液：將40ml濃縮洗滌液（20倍濃縮）用去離子水按照1：19稀釋（1份濃縮洗滌液+19份去離子水），或按所需用量配制洗滌液。

4、  編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、  加標準品/樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗體工作液，用蓋板膜蓋板，輕輕振蕩混勻，25℃環境反應30min。

6、  將孔內液體甩干，用稀釋后的洗滌液250μl/孔洗板4～5次，每次間隔15～30秒，用吸水紙拍干（拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

7、  顯色：加入底物A液50μl/孔，再加入底物B液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，25℃環境中避光顯色15min。

8、  測定：加入終止液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，5min內讀數），測定每孔OD值。